尊龙凯时细胞介绍：THP-1细胞系是从一名1岁男性急性单核细胞性白血病患者的外周血中分离建立的。该细胞具有吞噬乳胶颗粒和激活红细胞的能力，细胞膜和胞浆内不含免疫球蛋白，且表达C3R和FcR。这些细胞可通过佛波酯TPA的诱导实现向单核系的分化，并可作为转染宿主使用。

细胞信息：

细胞名称：THP-1人单核细胞白血病

生长特性：悬浮生长，低密度易聚团，高密度分散

倍增时间：60-70小时（PubMed=6970727）；26小时（PubMed=25984343）；约35-50小时（DSMZ=ACC-16）

换液频次：每周2-3次

传代比例：1:2-1:4（具体比例根据实际细胞量决定）

细胞密度应在8×10^6/ml进行传代，切勿超过1×10^6/ml。

培养基推荐配方：

RPMI-1640（中乔新舟货号：ZQ-200）+10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500）+1%双抗（中乔新舟货号：CSP006）+β-Mer终浓度：0.05mM（中乔新舟货号：CSP005，使用示例：500ml培养基添加500μl β-Mer）

β-巯基乙醇（β-Mer）是一种常见的细胞培养补充剂，具有抗氧化特性，能够减少氧化应激对THP-1细胞的影响。在细胞密度较高但需维持时，建议适当增加β-巯基乙醇的用量（不超过标准量的15倍）。

THP-1细胞复苏：

THP-1细胞复苏后通常需要3-5天才能恢复状态，细胞的生长密度对此有依赖性。如果在复苏过程中离心去除了冻存液，建议在复苏后48小时内避免操作。较低的细胞密度会导致细胞团聚，属于细胞快速增殖的正常现象。

THP-1细胞的传代：

A、THP-1细胞为悬浮细胞，具有低密度依赖性，需在细胞密度达到8×10^5个活细胞/mL时进行传代。细胞密度不得超过1×10^6个活细胞/mL。

B、传代比例一般为1:2-1:4，可以在分瓶后补充培养液，无需离心。在T25培养瓶中分瓶后，补充新鲜完全培养基至7ml。

C、若对悬浮细胞密度的控制不佳，最佳的方式是进行细胞计数。

D、一周左右可以进行一次离心，以去除部分死细胞。

THP-1细胞的冻存：

A、使用10%DMSO冻存液：900μl FBS + 100μl DMSO（操作时需小心，因DMSO具有毒性），或使用无血清细胞冻存液。

B、收集生长状态良好的细胞于15ml离心管中，调整细胞浓度至200万-300万/mL进行冻存。

C、可将细胞放入-80℃培养箱，最多保存3个月，尽快转移至液氮中进行长期保存。

常见问题：

1、在培养过程中，若THP-1细胞出现聚团，该如何处理？少量细胞聚团正常，尤其在低密度时更易出现。高密度时细胞自会分散。如高密度下聚团严重，可考虑调整细胞状态，增加β-巯基乙醇的量或更换培养基品牌和血清比例（不超过20%）。

2、若细胞发生贴壁现象，该怎么办？少量细胞贴壁是正常情况，可轻轻吹打震动或丢弃贴壁细胞。如果贴壁细胞占比超过20%，则需检查培养环境，包括温度、CO2浓度及培养基成分。

3、若THP-1细胞复苏不良，如何应对？冻存时应提高细胞量，活细胞密度不应低于100万-300万/mL。复苏后，细胞应在培养3-5天才能恢复状态，若有细胞碎片，应等细胞密度增大后进行低速离心去除。THP-1为悬浮细胞，培养时应尽量避免离心操作，以减少对细胞的损伤，换液时勿完全更换培养基。

4、THP-1细胞内应添加新鲜配制的β-巯基乙醇，避免直接添加至长期存储的培养基中，以保障β-巯基乙醇的稳定性。通过这些方法，您可以更好地管理和培育尊龙凯时的THP-1细胞。